为什么在进行基因型鉴定时没有条带或有非特异性条带?
在进行基因型鉴定PCR 时通常采用粗抽提的方法从鼠尾组织中提取基因组DNA,这类抽提方法获得的基因组DNA 含
有较多杂质,可能会影响后续PCR 的效率。可以考虑优化抽提方法,保证基因组DNA 质量。在PCR 反应体系中,基
因组DNA 的浓度也会影响PCR 的效率。基因组DNA 过多或过少都有可能导致PCR 扩增失败。可以考虑调整PCR 反
应体系。若PCR 鉴定出现非特异性条带,可以考虑提高退火温度,以提高引物的特异性结合。
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Cre-ERT2在无Tamoxifen诱导的情况下,在细胞质内处于无活性状态;当Tamoxifen诱导后,Tamoxifen的代谢产物4-OHT(雌激素类似物)与ERT结合,可使Cre-ERT2进核发挥Cre重组酶活性。
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