大小鼠采血方法大全：常用采血部位、操作步骤与注意事项

养鼠人必看！五种采血方式全解析

大小鼠采血是动物实验中的必备技能，常用方式包括尾尖采血、眼眶静脉丛采血、颌下静脉采血、隐静脉采血和心脏采血。小鼠循环血量约72 ml/kg（25g成年小鼠约1.8 ml），大鼠约64 ml/kg（250g成年大鼠约16 ml），单次采血量建议不超过循环血量的10%，失血超过15%可能引发血量减少性休克。各采血方式在采血量、是否需要麻醉、创伤程度和适用场景上各有不同：尾尖采血约0.1 ml适合血糖动态监测，眼眶静脉丛采血0.2-0.3 ml适合中等量连续监测，颌下静脉采血0.2-0.5 ml无需麻醉，隐静脉采血适合小量反复取样，心脏采血0.8-1.0 ml适用于终末期大量取血。多点采血时每周不超过循环血量的7.5%，采集10%循环血量后需约2周恢复。

本文目录

采血前须知：单次采血量与采血间隔

尾尖采血

眼眶静脉丛采血

颌下静脉采血

隐静脉采血

心脏采血

如何选择采血方式？

采血，是一个必备的动物实验技能。根据采血部位不同，大小鼠采血大致可分为：尾尖采血、眼眶静脉丛采血、颌下静脉采血、隐静脉采血、心脏采血等。本期，小编就给大家系统盘点大小鼠采血的相关知识——从采血量计算到各方式的操作要点，一次讲清楚。

1. 采血前须知：单次采血量与采血间隔

· 循环血量

小鼠约72 ml/kg。以25g成年小鼠为例，循环血量约1.8 ml。

大鼠约64 ml/kg。以250g成年大鼠为例，循环血量约16 ml。

表1. 大小鼠的循环血量

· 建议采血量

状况良好的小鼠，采血量建议不超过循环血量的10%。有研究表明失血超过15%以上，实验动物会发生血量减少性休克。以25g成年小鼠为例，10%的循环血量约为0.2 ml。

表2. 大小鼠建议最大采血量

· 恢复期

采集10%的循环血量后，大约需要2周时间恢复。不同采血量对应的恢复期如下：

表3. 大小鼠采血量及恢复期

· 多点采血原则

每周最大采血量不超过循环血量的7.5%；每两周最大采血量不超过循环血量的10%。

2. 尾尖采血

图4.  尾尖采血

操作要点：

· 麻醉小鼠后，用温水擦拭尾巴引起轻微血管扩张，但水温不要过高。

· 用无菌手术刀、刀片或锋利的剪刀，快速截断小鼠尾尖0.5-1 cm。如需多次采血，之后每次仅需截除2-3 mm。

· 可从尾部向尾尖方向按摩以增加血流，但这会降低血样质量，增加溶血风险。

· 可用毛细采血管收集血液，或直接滴入收集管中。

· 采血结束后，按压伤口或使用止血剂（如硝酸银）止血。

· 每次采血量约可达0.1 ml。

应用： 适用于所需血量少的连续多次采血，如血糖或血常规的动态检测。

3. 眼眶静脉丛采血

图5. 眼眶静脉丛采血

操作要点：

· 小鼠经气体麻醉后，左手拇指及食指压迫小鼠颈部两侧，使眼球突出、眼眶后静脉丛充血。也可将小鼠置于侧卧位，拇指与食指分别置于小鼠头顶和下颌，将皮肤向后及向下拉。

· 抓握时避免对气管施压，否则可能影响小鼠呼吸。

· 将毛细采血管置于内侧眼角处，以与鼻翼平面成30-45度刺入。

· 在轻轻旋转采血管的同时施加压力，血液将通过毛细作用流入采血管。

· 不能刺得过深，一般2-3 mm即可。

· 采血结束后，立即松开手指对小鼠的压迫，使眼球复位，同时将采血器拔出。

· 可用干棉球压住眼眶，确保止血。

· 一般采血量可达0.2-0.3 ml。

应用： 适用于需中等量血液、避免小鼠死亡的血液指标连续监测。

4. 颌下静脉采血

图6.  颌下静脉采血

操作要点：

· 保定小鼠，可将小鼠侧卧，使头部尽量固定。

· 在小鼠嘴角沿线与外眼角线交汇处找到颌下静脉的大致位置，会发现一个无毛的小点（类似酒窝），基本位于嘴角远端稍低于下巴线。

· 针保持垂直于皮肤表面刺入，深度不超过针头的斜面。

· 拔出针头后血液流出，可使小鼠头部低于心脏高度以方便采血。

· 可直接使血液滴入采集管，也可使用毛细采血管。

· 采血结束后，按压止血。

· 一般采血量为0.2-0.5 ml。

应用： 小量反复采血，无需麻醉，适用于所需血量少的连续多次采血。

5. 隐静脉采血

图7.  隐静脉采血

操作要点：

· 将小鼠置于固定管或架中，保持后腿可自由活动，剃除跗部的毛。

· 为使膝盖与踝关节之间的隐静脉更明显，可在后腿膝盖以上使用止血带。在近尾侧的皮肤表面可找到隐静脉。

· 针垂直于皮肤表面扎破血管，不要进针过深以免刺穿肌肉或碰到骨头。

· 血液会从入针处慢慢流出，用毛细采血管收集，并松开止血带。

· 采血结束后，按压伤口或使用止血剂（如硝酸银）止血，将小鼠放回笼内。

图8.  应用： 小量反复采血，无需麻醉，适用于所需血量少的连续多次采血。

6. 心脏采血

图9.  心脏采血

一般有3种心脏采血姿势：

· 姿势一： 托起小鼠躯干使身体垂直于地面，身体直立以防止心脏偏转或胸部扭曲。使用1 ml注射器和22g针头，将针头从胸部中央向下5 mm处插入，深度5-10 mm，注射器与胸部保持25-30度。

· 姿势二： 使小鼠仰卧，通过胸骨垂直插入针头。

· 姿势三： 使小鼠侧卧，垂直于胸壁插入针头。

操作提示：

· 如果血液没有立刻进入注射器，可轻轻抽空针管产生真空区。

· 当注射器中出现血液时，将针管保持静止并轻轻抽拉活塞芯杆以获得更多血液。

· 一般可采到0.8-1.0 ml血液。

应用： 适用于需血量大的实验终末期动物采血，常用于血常规、免疫、生化指标的检测。

如何选择采血方式？

图10.  不同采血方式的特点概况

看完了方法，别忘了要练习哦！祝愿大家采血顺利~

参考文献

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[2] Diehl K. H. A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes. J.Appl.Toxicol. 21, 15-23 (2001).

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