大小鼠给药方法全攻略:口鼻给药、腹腔注射、尾静脉注射、灌胃等7种途径操作详解


大小鼠给药是动物实验的关键操作环节,常见给药途径包括口鼻给药(IN)、肌肉注射(IM)、腹腔注射(IP)、皮下注射(SC)、皮内注射(ID)、尾静脉注射(IV)和灌胃(IG)。不同途径对药物吸收速率、生物利用度和实验适宜性有直接影响。本文逐一讲解七种给药方式的操作步骤、注射角度、针头规格选择及注意事项,并附有推荐剂量与针头尺寸对照表,帮助实验人员规范操作、减少动物损伤。

目录

注射器选择

01 口鼻给药(IN)

02 肌肉注射(IM)

03 腹腔注射(IP)

04 皮下注射(SC)

05 皮内注射(ID)

06 血管内注射(IV)

07 灌胃(IG)

南模生物疾病模型服务

注射器选择:工欲善其事必先利其器

市面上的注射器五花八门,不同给药途径对注射器和针头的要求也不一样。先来了解几个基本要点:


Figure 1. A) Needle and B) syringe parts, labeled. C) Burr on needle caused by repeated placement of the needle into a multi-use vial. D) Needle recapper in use.-南模生物
Figure 1. A) Needle and B) syringe parts, labeled. C) Burr on needle caused by repeated placement of the needle into a multi-use vial. D) Needle recapper in use.

· 结构认识 针有尖、斜面、轴和轮毂;注射器有针头、桶和柱塞(Fig1. A、B)。有些注射器有锁头,请确保针头稳定连接在注射器上。

· 针头规格 针按规格和长度定大小,量规数越大针越小。小针容易变钝(针尖形成毛刺)(Fig1.C)。插入动物时针口斜面向上,尤其是静脉注射。

· 操作建议 不熟悉的操作者建议先练习,理想情况下能用一只手操作注射器和针头,另一只手约束动物。手部稳定可减少针的移动和组织损伤。

· 药剂黏稠度 水性药剂比油性等较粘稠的药剂更容易注入。注射较浓的化合物时要非常缓慢,避免针头从注射器中脱落。

· 安全处置 针头和注射器应妥善放置在有标记的利器盒内,避免被刺伤。如需重复使用,可使用专用回套器(Fig1.D)。

01 口鼻给药(Intranasal, IN)


口鼻给药(Intranasal, IN)-南模生物
口鼻给药(Intranasal, IN)

· 操作步骤

按正确方式抓取动物。

使用注射器或吸管,将少量药剂滴于动物的鼻孔处。

注意观察药剂消失在鼻孔里。

重复上述操作,直到所需给药量完成。

02 肌肉注射(Intramuscular, IM)


肌肉注射(Intramuscular, IM)-南模生物
肌肉注射(Intramuscular, IM)

· 操作步骤

正确抓取动物,确保一个后腿自由。抓握可能需要两个人配合,动物在注射过程中踢腿容易造成肌肉损伤。

针头垂直于动物皮肤插入,使用适当大小的注射器和针头,将药物注射到动物的股四头肌(大腿前部)或大腿外侧肌肉群,插入深度没过针的斜面。

注意:不要注射到后面的肌肉群,可能损伤坐骨神经。

若需多次肌肉注射,应双腿交替。

03 腹腔注射(Intraperitoneal, IP)

腹腔注射(Intraperitoneal, IP)-南模生物
腹腔注射(Intraperitoneal, IP)

· 操作步骤

正确抓取动物,将动物鼻子朝向地面,露出腹部。

定位动物的中线并将腹部分成四个象限(Fig. 2)。右下象限是腹腔注射的合适位置(因为该区域无重要解剖结构)。

使用适当大小的注射器和针头,将药品注射到动物体内。

若需多次腹腔注射,应交替注射位置象限。



Figure 2. Quadrants of the ventral abdomen. Only inject into the lower two quadrants, preferentially the right lower quadrant.-南模生物
Figure 2. Quadrants of the ventral abdomen. Only inject into the lower two quadrants, preferentially the right lower quadrant.

04 皮下注射(Subcutaneous, SC/SQ)


皮下注射(Subcutaneous, SC/SQ)-南模生物
皮下注射(Subcutaneous, SC/SQ)

· 操作步骤

正确抓取动物,抓握要足够宽松以使皮肤能活动。

若需多次皮下注射,可交替注射部位。

把皮肤轻轻向上拉,形成一个"帐篷"。

30°–45° 角将针头插入帐篷状皮肤,然后注射药剂。平行地从手指处注射,手指向上以支撑皮肤。

注射成功后可看到皮下有一个小肿块。注射后温和地压住注射位置,防止药剂回流。

05 皮内注射(Intradermal, ID)


皮内注射(Intradermal, ID)-南模生物
皮内注射(Intradermal, ID)

· 操作步骤

皮内注射前需给动物剃毛以暴露皮肤。

多次皮内注射抓握困难,需要麻醉。以 15°–30° 角将针插入皮肤,不要插太深,注射时应有阻力。另一种方法是轻轻按压注射部位附近的皮肤,以非常浅的角度插入针头,可有效防止小鼠在注射过程中移动。

注射成功后会看到一个小水泡,比周围皮肤白。

注射后温和地压住注射位置,防止药剂回流。

06 血管内注射(Intravascular, IV)


血管内注射(Intravascular, IV)-南模生物
血管内注射(Intravascular, IV)

· 基本信息

左右侧尾静脉是小鼠和大鼠最常见的血管通路。

其他血管通路也可用于注射,但一般需要麻醉和注射后镇痛。

尾静脉注射时可使用保定袋或约束装置辅助操作。

· 操作步骤

把动物尾巴放在灯下或有保护的加热装置上,促进血管舒张便于注射(注意不要让动物过热)。对于雄性大鼠,清理尾巴上的皮肤鳞片可清楚看到静脉(清洁时要轻柔,避免擦伤皮肤)。

用左手抓住动物尾巴尖,把尾巴拉直。

90° 旋转尾部,尾静脉注射更容易(两条侧尾静脉和一条腹侧尾动脉,见 Fig. 3)。

15°–20° 角从尾巴远端开始进针(静脉很浅,插入深度不宜超过斜面太多)。尽可能远离尾巴根部开始注射,保证第一次尝试失败后仍有未受损静脉可用。

成功插入注射没有阻力,注射部位变苍白(注射前不要抽吸以免静脉衰竭,注射后轻柔按压穿刺部位防止出血)。若注射不成功,注射器将不容易推动。


Figure 3. Schematic of the tail in cross-section, illustrating the relationship of the arteries and veins to the bony and tendenous structures.-南模生物
Figure 3. Schematic of the tail in cross-section, illustrating the relationship of the arteries and veins to the bony and tendenous structures.


07 灌胃(Intragastric, IG)


灌胃(Intragastric, IG)-南模生物
灌胃(Intragastric, IG)

· 操作步骤

只能对被抓取的、清醒的动物进行灌胃,麻醉会增加误吸风险(物质无意中进入肺部)。

选择适当大小的口服灌胃针,防止其进入气管。

所需长度从动物嘴角开始测量(Fig. 4),灌胃针球头应达到动物最后一根肋骨。

把动物头和身体控制在一条直线上,拉直食道使进食管更容易通过。

将灌胃针尖端插入动物嘴里压住舌头,针头就位后轻轻压在上颚上,让动物鼻子朝向天花板。(大鼠中,穿过喉咙后部时可能需要稍微改变方向,出现任何阻力都表明需要调整位置。)

继续穿针直到达到预定距离。针应容易通过,动物不应喘息或窒息。

注射药物使其流入胃部。如果有阻力或动物喘息、窒息、变成青紫色,应立即停止操作拔针,情况严重需安乐死。


Figure 4. Gavage needle sizing in rats. A) Gavage needle too long. B) Appropriately sized gavage needle. C) Gavage needle measurement too short. D) Palpating for the last rib to determine appropriate gavage needle size.-南模生物
Figure 4. Gavage needle sizing in rats. A) Gavage needle too long. B) Appropriately sized gavage needle. C) Gavage needle measurement too short. D) Palpating for the last rib to determine appropriate gavage needle size.

温馨提示

· 给药途径与吸收 给药途径会影响药物的吸收、生物利用度和特定实验的适宜性。如希望以较慢的方式给药,就不应使用促进快速吸收的途径(如静脉注射或腹腔注射)。

· 设备尺寸与药物体积 给实验室啮齿动物用药,应考虑适当的设备尺寸和药物体积(Table 1)。设备尺寸不当或体积过大可能导致动物不适、受伤或死亡。一般情况下,非肠道给药应无菌操作。


Table 1. Recommended doses and needle sizes for various routes of compound administration in mice and rats.-南模生物
Table 1. Recommended doses and needle sizes for various routes of compound administration in mice and rats.

· pH 值要求 化合物和生物制剂应放在对动物影响最小的溶质或载体中。通常使用生理 pH 值(7.3–7.4),尤其是皮下、肌内和腹腔内给药时。通过这些途径给药的非生理 pH 值可能导致疼痛、坏死和组织损伤。更大范围的 pH 值可通过胃内和静脉途径耐受。

· 体温维持 在小型啮齿类动物中,如果提供大量室温液体(尤其是静脉或腹腔注射),注意不要使动物体温降低,应将液体加热至体温(37°C)。

· 操作培训 动物相关操作的培训对研究成功至关重要。动物处理得越好,压力越小,而动物压力已被证明会影响研究结果。温和的人际接触可减轻动物压力,使动物更容易驯养。

南模生物疾病模型服务

南模生物已建立多种手术或药物诱导的经典人类疾病大小鼠模型,可为相关疾病发病机制研究、基因或蛋白在疾病中的功能研究、疾病药物筛选与疗效评价等提供良好的动物模型。

关于我们

上海南方模式生物科技股份有限公司(Shanghai Model Organisms Center, Inc.,简称"南模生物"),成立于 2000 年 9 月,是一家上交所科创板上市高科技生物公司(,始终以编辑基因、解码生命为己任,专注于模式生物领域,打造了以基因修饰动物模型研发为核心,涵盖多物种模型构建、饲养繁育、表型分析、药物临床前评价等多个技术平台,致力于为全球高校、科研院所、制药企业等客户提供全方位、一体化的基因修饰动物模型产品解决方案。

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声明:文中图表及视频均来源于 JOVE Video Article: Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats



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