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文献

Cysteamine dioxygenase (ADO) governs cancer cell mitochondrial redox homeostasis through proline metabolism

模式生物:小鼠 产品与服务:Ado-KO 研究领域:肿瘤及肿瘤免疫;2-氨基乙硫醇双加氧酶 (ADO)

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Targeting UXS1-Dependent Glucuronate Detoxification Potentiates Metformin's Anti-Tumor Efficacy in Lung Adenocarcinoma

模式生物:小鼠 产品与服务:Kras-G12D 研究领域:肺腺癌;肿瘤;二甲双胍

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Nature Medicine | 更精准的谱系示踪技术问世

谱系示踪技术 DeaLT 系统 DeaLT-IR系统

2017年11月13日,Nature Medicine 在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组的科研成果“Enhancing the precision of genetic lineage tracing using dual recombinases ”。该研究将 Dre-rox 重组系统引入到传统的基于 Cre-loxP 重组系统的遗传谱系示踪技术中,有效地规避了由于 Cre 表达的不特异性而导致的非特异性(“异位”)同源重组,实现了更为精准的遗传谱系示踪,为发育、干细胞及再生等领域的深入研究奠定了可靠的技术基础。上海南方模式生物作为共同作者单位,为该研究构建了10种小鼠模型:IR1, IR2, NR1, NR2, CAG-DreER, Tnni3-Dre, Tnnt2-Dre, Alb-CreER, CK19-Dre 和 Alb-DreER。

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基因修饰小鼠的“发光密码”:荧光素酶选择全攻略

本文聚焦Firefly luciferase(FLuc)、AkaLuc、NanoLuc(NLuc)、Gaussia luciferase(GLuc)及RLuc(Renilla luciferase)五大主流类型,深度解析其技术特点与选型策略。

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交叉报告基因系统原理详解:Cre-loxP与Dre-Rox双重组酶如何实现双阳性细胞精准标记

本文系统讲解单色与多色两种交叉报告系统的设计原理和标记逻辑,并以细支气管肺泡干细胞(BASC)为案例,展示这类报告基因工具鼠在肺干细胞谱系追踪中的应用。

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报告基因工具鼠如何精确标记目的细胞?——嵌套报告基因系统详解

在谱系示踪研究中,基因异位表达会干扰细胞命运追踪的准确性。嵌套报告基因系统是一种双重组酶介导的遗传标记方法,通过将内部重组位点"嵌套"在外部重组位点之中,实现对 A⁺B⁻ 细胞的精确标记,同时将异位表达的细胞标注为不同颜色加以排除。本文详细解析嵌套报告基因系统的原理、实际案例及与独家报告系统的对比选择策略。

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谱系示踪中基因标记异位表达的解决方案:独家报告基因系统原理与案例详解

谱系示踪中,启动子在非目标细胞中的弱激活(异位表达)是导致细胞命运追踪争议的常见原因。独家报告基因系统(Exclusive Reporter)利用Cre-loxP与Dre-Rox双重组酶的错落排布,使首次重组自动阻断二次重组,从而实现A⁺B⁻细胞的精准标记,排除异位表达干扰。本文详解独家报告基因系统的结构设计、两种重组先后顺序下的标记逻辑,以及c-kit基因在心脏谱系追踪中的经典应用案例,为选择合适的报告基因工具鼠提供参考。

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【谱系示踪系列第三期】多重组酶介导的交叉报告基因方法

上期讲述的单重组酶报告基因系统只能依赖一个 Maker 来定位我们的目的细胞,如果没有特定细胞类型特有的基因,则无法通过常规方法对其进行特异性标记。往期推文:【谱系示踪系列第一期】基础细胞标记方式【谱系示踪系列第二期】单重组酶介导的多色报告系统方法但随着细胞分类的不断深入,我们往往需要两个甚至两个以

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谱系示踪的难点——基因标记的异位表达如何避免?(上)

通常,细胞类型中基因的激活不是“有”或“无”,特定的基因标记意味着启动子的活性在这种细胞类型中相对较高,而在其他细胞中,目的启动子也可能被弱激活,这种现象也被叫做异位表达。异位表达对谱系追踪的影响很大,常常会导致一些关于细胞命运的争议。

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谱系示踪的难点——基因标记的异位表达如何避免?(中)

在遗传谱系追踪实验的设计过程中,基因的异位表达往往需要我们着重关注的问题。目的启动子在非目的组织中的表达被称为异位表达。为了更精准的标记特定细胞类型,避免异位表达的影响,我们可以借助两个(甚至以上)的标记物进行标记,这时标记细胞就需要使用到多重组酶介导的遗传方法。图. 异位表达对谱系示踪的影响[1]

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