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转基因小鼠构建Cre-lox系统常见问题:从建系到繁育的避坑指南

本文汇总Cre-lox系统四大高频问题——随机转基因小鼠与定点敲入的表达差异、Reporter小鼠验证Cre表达谱的方法、生殖系意外表达的排查与应对、条件性基因敲除小鼠(cKO)的标准繁育路径,帮你在实验设计阶段就把问题拦住。

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Cre-lox系统介绍及使用汇总

你一定听说过Cre-lox重组系统,无论你是否直接进行过基因操作。由于Cre-lox系统具有操作简单、重组率高的优点,如今已经成为体内外遗传操作的强有力工具。利用Cre-lox系统,可以在特定细胞、组织或整个生物体,甚至在特定时间点敲除或表达某个基因,实现对特定基因的时空特异性操作,这对基因功能的研究和人类疾病动物模型的建立都具有深刻影响。

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Nature Medicine | 更精准的谱系示踪技术问世

谱系示踪技术 DeaLT 系统 DeaLT-IR系统

2017年11月13日,Nature Medicine 在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组的科研成果“Enhancing the precision of genetic lineage tracing using dual recombinases ”。该研究将 Dre-rox 重组系统引入到传统的基于 Cre-loxP 重组系统的遗传谱系示踪技术中,有效地规避了由于 Cre 表达的不特异性而导致的非特异性(“异位”)同源重组,实现了更为精准的遗传谱系示踪,为发育、干细胞及再生等领域的深入研究奠定了可靠的技术基础。上海南方模式生物作为共同作者单位,为该研究构建了10种小鼠模型:IR1, IR2, NR1, NR2, CAG-DreER, Tnni3-Dre, Tnnt2-Dre, Alb-CreER, CK19-Dre 和 Alb-DreER。

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基因敲除小鼠WB还有条带?三个原因帮你逐一排查

本文从CRISPR/Cas9构建原理出发,系统解析敲除后仍检测到蛋白的三大常见原因——抗体特异性不足、截断蛋白残留、多转录本未完全覆盖,并提供对应的排查策略,帮助使用基因修饰模型的研究者高效定位问题、优化遗传修饰动物模型的表型验证流程。

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Cancer Cell | 肝癌免疫治疗新靶点STK40,双管齐下克服耐药

上海交大团队借助 CRISPR-Cas9 筛选,发现STK40是肝癌免疫逃逸关键靶点。该基因通过双重通路介导耐药:既加速 IFNGR1 降解,削弱肿瘤对 CD8⁺ T 细胞杀伤的敏感性,又抑制 GM-CSF 分泌,阻碍 cDC1 激活 T 细胞。利用 LNP-siRNA 靶向 STK40,联合抗 PD-1 疗法可显著抑制肿瘤,为肝癌免疫治疗耐药提供新方案。

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【公开课 】基因修饰小鼠使用之入门知识分享

如何获取基因修饰小鼠的前期资料?不同技术制备的小鼠中有哪些注意事项?本期课程将带你一一了解。

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小胶质细胞基因靶向模型:Tmem119-CreERT2

南模生物自主研发,构建了一种新的小胶质细胞基因靶向模型,Tmem119-CreERT2工具小鼠,该小鼠可用于特异性研究小胶质细胞的功能。

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从ex vivo到in vivo:CAR-T细胞治疗的第二次革命

本文介绍 CAR-T 疗法从体外(ex vivo)向体内(in vivo)的技术变革,指出体外 CAR-T 存在耗时、成本高、实体瘤疗效有限等问题,体内 CAR-T 可直接在体内重编程 T 细胞,优势显著;医药巨头重金布局该赛道,人源化小鼠模型是其临床前转化关键工具。

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【文献解读】KI小鼠模型揭示肿瘤血管新生的新靶标

10月30日,中科院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组在Cell Reports在线发表了最新成果“Apj+ vessels drive tumor growth and represent a tractable therapeutic target”。

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小鼠大学问 | Cre-lox系统的常见问题汇总

上一期我们给大家介绍了Cre-lox系统的基本原理,不知道大家有没有理解呢?点击查看:小鼠大学问 | Cre-Lox系统核心原理全解析本期我们给大家带来了Cre-lox系统的一些常见问题,可以帮助大家更好地利用Cre-lox系统进行研究。Cre小鼠的建立方法对Cre表达的影响早期构建Cre小鼠主要采

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