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Cre-lox系统介绍及使用汇总

你一定听说过Cre-lox重组系统,无论你是否直接进行过基因操作。由于Cre-lox系统具有操作简单、重组率高的优点,如今已经成为体内外遗传操作的强有力工具。利用Cre-lox系统,可以在特定细胞、组织或整个生物体,甚至在特定时间点敲除或表达某个基因,实现对特定基因的时空特异性操作,这对基因功能的研究和人类疾病动物模型的建立都具有深刻影响。

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【谱系示踪系列第三期】多重组酶介导的交叉报告基因方法

上期讲述的单重组酶报告基因系统只能依赖一个 Maker 来定位我们的目的细胞,如果没有特定细胞类型特有的基因,则无法通过常规方法对其进行特异性标记。往期推文:【谱系示踪系列第一期】基础细胞标记方式【谱系示踪系列第二期】单重组酶介导的多色报告系统方法但随着细胞分类的不断深入,我们往往需要两个甚至两个以

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Cancer Cell | 肝癌免疫治疗新靶点STK40,双管齐下克服耐药

上海交大团队借助 CRISPR-Cas9 筛选,发现STK40是肝癌免疫逃逸关键靶点。该基因通过双重通路介导耐药:既加速 IFNGR1 降解,削弱肿瘤对 CD8⁺ T 细胞杀伤的敏感性,又抑制 GM-CSF 分泌,阻碍 cDC1 激活 T 细胞。利用 LNP-siRNA 靶向 STK40,联合抗 PD-1 疗法可显著抑制肿瘤,为肝癌免疫治疗耐药提供新方案。

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TCR转基因小鼠怎么选?CD45.1/CD45.2、Thy1.1/Thy1.2、OT-1/OT-2免疫学工具小鼠全解析

免疫学实验中,CD45.1/CD45.2、Thy1.1/Thy1.2、OT-1/OT-2这三对转基因小鼠是细胞追踪和过继转移的核心工具小鼠。CD45.1与CD45.2是白细胞共同抗原的两种亚型,可区分供体与受体来源细胞;Thy1.1与Thy1.2是胸腺细胞抗原的等位基因变体,在肿瘤免疫和神经免疫中广泛应用;OT-1和OT-2则是两种TCR转基因小鼠,分别识别OVA蛋白的不同肽段,用于CD8⁺和CD4⁺ T细胞功能研究。本文系统梳理这三对工具小鼠的分子基础、品系分布与实验应用,帮助研究者根据实验目的精准选型。

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老套路新玩法,关于Cre鲜为人知的一面

传统的Cre-lox系统虽然可以特异性的标记目的细胞的靶基因。同时后续也可以通过CreERT2的方式,实现时间上对Cre的控制。但是在使用过程中还是常常遇到各种问题:单基因是否能特异性的标记某类细胞?他莫昔芬诱导要不要考虑代谢问题,毒性问题呢?万一这类细胞找不到合适的靶基因又该怎么呢?今天小编为您细说Cre-lox系统的老套路和新玩法。

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Dev Cell | 周斌研究组利用谱系示踪技术无缝隙捕捉体内肿瘤转移中的EMT过程

7月14日,国际知名学术期刊Developmental Cell在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)周斌研究组的研究成果“Genetic Fate Mapping of Transient Cell Fate Reveals N-cadherin Activity and Function in Tumor Metastasis”。南模生物为该研究提供了Vim LSL-Dre;N-cad-LSL-Dre小鼠模型。

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Circulation | 利用DeaLT技术揭示成人心肌细胞再生的来源

DeaLT技术 心肌细胞

4月26日,国际学术期刊Circulation在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组的研究成果“Genetic Lineage Tracing of Non-myocyte Population by Dual Recombinases”。

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Cell Research | Cre-loxp系统揭秘 m6A RNA 修饰如何调控精子发生

m6A修饰 精子发生

2017年9月15日,Cell Research 在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所童明汉研究组的研究成果 “Mettl3/Mettl14-mediated mRNA N6-methyladenosine modulates murine spermatogenesis”。该研究绘制了小鼠不同发育阶段生精细胞的 m6A RNA 修饰图谱,揭示了 m6A RNA 修饰通过调控精子发生过程中关键基因的转录后翻译,从而控制精子发生的分子机制。文中 Stra8-GFPCre 小鼠由南模生物构建。

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核受体:非酒精性脂肪性肝病的潜在治疗靶点

NAFLD 非酒精性脂肪性肝病

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一类与胰岛素抵抗、肥胖和二型糖尿病等密切相关的复杂慢性肝病,其病理生理机制复杂,涉及多个细胞通路和分子因素。核受体已成为NAFLD中脂质代谢和炎症的重要调节因子,为NAFLD提供了潜在的治疗靶点。

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小鼠骨转移癌模型构建与骨癌痛行为评估:MDA-MB-231股骨接种方案及Gabapentin药效验证

骨癌痛(Cancer-induced bone pain, CIBP)是晚期肿瘤骨转移患者面临的严重临床问题,约75%的晚期癌症患者经历中度至重度疼痛,且超过一半无法通过现有药物有效缓解。本文介绍骨癌痛的发生机制(炎症性、伤害性、神经病理性)、常用骨癌痛动物模型的建立方法,以及南模生物基于MDA-MB-231细胞/BALB/c nude裸鼠的股骨骨髓接种方案,涵盖自发痛、机械痛敏、热痛敏和行走痛四项行为学评估指标及Gabapentin阳性药验证数据。

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