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ProxCre、CrexER与dCreER:三种Cre重组酶优化策略如何解决谱系示踪中的异位表达问题

在谱系示踪实验中,单一 Marker 的异位表达是困扰研究者的核心难题。前几期我们介绍了通过改造报告基因工具鼠来提高标记特异性的方案,本期将聚焦另一条技术路线——对重组酶本身进行改造。roxCre、CrexER、dCreER 三种遗传策略,通过让一种重组酶调控另一种重组酶的活性,配合转基因小鼠和报告系统,实现了对 A⁺B⁺ 或 A⁺B⁻ 细胞群的精准标记,为遗传修饰动物模型在细胞命运研究中的应用提供了有力工具。

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【谱系示踪系列第三期】多重组酶介导的交叉报告基因方法

上期讲述的单重组酶报告基因系统只能依赖一个 Maker 来定位我们的目的细胞,如果没有特定细胞类型特有的基因,则无法通过常规方法对其进行特异性标记。往期推文:【谱系示踪系列第一期】基础细胞标记方式【谱系示踪系列第二期】单重组酶介导的多色报告系统方法但随着细胞分类的不断深入,我们往往需要两个甚至两个以

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PNPLA3 I148M点突变小鼠与人源化小鼠模型——MASLD/MASH药物评价的关键工具

PNPLA3 I148M是MASLD/MASH领域验证最充分的遗传风险位点。围绕该靶点,阿斯利康AZD2693(ASO)已推进至II期临床,Arrowhead/Madrigal的ARO-PNPLA3(siRNA)在I期试验中单次给药降低肝脏脂肪高达46%,辉瑞小分子PF-07853578则已终止开发。在临床前研究中,携带I148M的点突变小鼠和肝脏特异性过表达的人源化小鼠模型是评价这些候选药物药效的核心工具。南模生物围绕PNPLA3靶点构建了多款遗传修饰动物模型,其中HSD诱导的肝脏特异性过表达hPNPLA3 I148M模型已展现出类人脂肪变性与纤维化表型。

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谱系示踪的难点——基因标记的异位表达如何避免?(下)

通常,细胞或组织中的特异性 Marker 意味着启动子的活性在这种细胞类型中相对较高,而并非在其他细胞中完全不表达。在其他细胞中,目的启动子也可能被弱激活,这种现象也被叫做异位表达。异位表达对谱系追踪的影响很大,常常会导致一些关于细胞命运的争议。

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谱系示踪的难点——基因标记的异位表达如何避免?(中)

在遗传谱系追踪实验的设计过程中,基因的异位表达往往需要我们着重关注的问题。目的启动子在非目的组织中的表达被称为异位表达。为了更精准的标记特定细胞类型,避免异位表达的影响,我们可以借助两个(甚至以上)的标记物进行标记,这时标记细胞就需要使用到多重组酶介导的遗传方法。图. 异位表达对谱系示踪的影响[1]

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全面解析!哮喘和特应性皮炎的强势靶点IL-4R

靶向IL-4R的药物适应症有特应性皮炎、哮喘、慢性鼻窦炎伴鼻息肉病、嗜酸性食管炎、结节性痒疹等,而这个重磅消息将再次扩大其适应症范围。

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想搞懂谱系示踪课题设计,收藏这一篇就够了

想做细胞命运的相关研究,但谱系示踪的东西又繁琐又复杂?刚开始设计课题,已经被各类Cre/Dre工具鼠的介绍文献搞晕了,这该怎么办呢?别担心,本篇推文从实验设计思路开始,帮您梳理谱系示踪中各类工具的应用。Step 1了解谱系示踪是什么?谱系示踪,通常是指使用各种手段对某类祖细胞亚群进行标记,在后续时间

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小鼠大学问 | Cre-Lox系统核心原理全解析

不论你是否直接进行过基因操作,你一定听说过Cre-lox系统。由于Cre-lox系统具有操作简单、重组率高的优点,如今已经成为体内外遗传操作的强有力工具。利用Cre-lox系统,可以在特定细胞、组织或整个生物体,甚至在特定时间点敲除或表达某个基因,实现对特定基因的时空特异性操作,这对基因功能的研究和

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【文献解读】发热究竟如何促进免疫?

免疫细胞 发热促进免疫细胞

1月15日,国际知名学术期刊《Immunity》在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所陈剑峰研究团队的最新研究成果“Fever Promotes T Lymphocyte Trafficking via a Thermal Sensory Pathway Involving Heat Shock Protein 90 and α4 Integrins”。该工作揭示了发热促进免疫细胞迁移的分子机制,以及该机制在机体免疫调控中的重要功能。

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紧随指南—脑科学研究动物模型汇总

南模生物在小鼠大脑细胞特定标记基因中敲入Cre/Dre重组酶元件,研究者可以对每类细胞进行定义、标记及区分;或在特定神经细胞中进行精确的基因及细胞功能研究。同时自主构建了多种基因修饰小鼠,可用于阿尔兹海默病(AD)、帕金森(PD)、自闭症(ASD)等重大脑病的研究。

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