热销免疫缺陷小鼠
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在谱系示踪研究中,基因异位表达会干扰细胞命运追踪的准确性。嵌套报告基因系统是一种双重组酶介导的遗传标记方法,通过将内部重组位点"嵌套"在外部重组位点之中,实现对 A⁺B⁻ 细胞的精确标记,同时将异位表达的细胞标注为不同颜色加以排除。本文详细解析嵌套报告基因系统的原理、实际案例及与独家报告系统的对比选择策略。
本文从实验设计思路出发,系统梳理Cre-loxP系统在谱系示踪中的应用逻辑——从单Marker基础模式到多Marker升级模式,从单色报告到交叉/独家/嵌套报告基因系统,再到双重组酶联用的实战案例(EMTracer系统追踪肿瘤EMT),帮你理清遗传修饰动物模型的组合策略,一篇搞定课题设计中的选鼠难题。
上期讲述的单重组酶报告基因系统只能依赖一个 Maker 来定位我们的目的细胞,如果没有特定细胞类型特有的基因,则无法通过常规方法对其进行特异性标记。往期推文:【谱系示踪系列第一期】基础细胞标记方式【谱系示踪系列第二期】单重组酶介导的多色报告系统方法但随着细胞分类的不断深入,我们往往需要两个甚至两个以
有了单细胞测序数据,如何出其不意,发表高水平文章,冲击CNS,走上人生巅峰呢?用好基因修饰小鼠是您的不二选择。
在遗传谱系追踪实验的设计过程中,基因的异位表达往往需要我们着重关注的问题。目的启动子在非目的组织中的表达被称为异位表达。为了更精准的标记特定细胞类型,避免异位表达的影响,我们可以借助两个(甚至以上)的标记物进行标记,这时标记细胞就需要使用到多重组酶介导的遗传方法。图. 异位表达对谱系示踪的影响[1]
想做细胞命运的相关研究,但谱系示踪的东西又繁琐又复杂?刚开始设计课题,已经被各类Cre/Dre工具鼠的介绍文献搞晕了,这该怎么办呢?别担心,本篇推文从实验设计思路开始,帮您梳理谱系示踪中各类工具的应用。Step 1了解谱系示踪是什么?谱系示踪,通常是指使用各种手段对某类祖细胞亚群进行标记,在后续时间
又是一年开学时刻!鼠博士不禁哼起小调:美美September,手里握着课题,知识点汇聚交集,让我们来一起选动物模型~鼠博士为大家贴心总结了常见的问题,大家可以按需查看推荐模型:1. 如何研究目的基因的功能?→基因敲除鼠2. 如何研究目的基因点突变的功能?→点突变鼠3. 如何精准定位目的基因的表达区域
表观遗传学 同源重组 H3K4me3
2020年2月11日,中科院分子细胞卓越创新中心(上海生物化学与细胞生物学研究所)童明汉课题组与复旦大学生物医学研究院/附属中山医院蓝斐课题组、北京大学汤富酬课题组合作在Cell Research上发表论文“Refined spatial temporal epigenomic profiling reveals intrinsic connection between PRDM9-mediated H3K4me3 and the fate of double-stranded breaks”。
该研究使用CAG-GFP绿色荧光报告小鼠(品系:B6.Cg-Tg(CAG-GFP)Smoc,目录号:NM-TG-00005)结合胚胎转录组分析与受精卵sgRNA/Cas9注射敲除,证实VIRMA/METTL3沉积的m6A修饰经IGF2BP3识别稳定Gata6等PrE特异mRNA、决定胚胎第二次细胞命运,发表于Nature Communications(IF=18.1)。为早期胚胎发育、细胞命运决定、m6A表观转录组、干细胞工程等方向提供了转基因报告小鼠研究策略和高分期刊发文案例。同济大学高绍荣、高亚威团队与北京大学刘军团队完成。
肝 谱系示踪
2月26日,国际学术期刊 Science 以 Research Article形式在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)周斌研究组的研究成果“Proliferation tracing reveals regional hepatocyte generation in liver homeostasis and repair”。南模生物为该研究构建了关键的Ki67-CreXER2小鼠模型。