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谱系示踪中基因标记异位表达的解决方案：独家报告基因系统原理与案例详解

谱系示踪中，启动子在非目标细胞中的弱激活（异位表达）是导致细胞命运追踪争议的常见原因。独家报告基因系统（Exclusive Reporter）利用Cre-loxP与Dre-Rox双重组酶的错落排布，使首次重组自动阻断二次重组，从而实现A⁺B⁻细胞的精准标记，排除异位表达干扰。本文详解独家报告基因系统的结构设计、两种重组先后顺序下的标记逻辑，以及c-kit基因在心脏谱系追踪中的经典应用案例，为选择合适的报告基因工具鼠提供参考。

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谱系示踪的难点——基因标记的异位表达如何避免？（下）

通常，细胞或组织中的特异性 Marker 意味着启动子的活性在这种细胞类型中相对较高，而并非在其他细胞中完全不表达。在其他细胞中，目的启动子也可能被弱激活，这种现象也被叫做异位表达。异位表达对谱系追踪的影响很大，常常会导致一些关于细胞命运的争议。

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谱系示踪的难点——基因标记的异位表达如何避免？（上）

通常，细胞类型中基因的激活不是“有”或“无”，特定的基因标记意味着启动子的活性在这种细胞类型中相对较高，而在其他细胞中，目的启动子也可能被弱激活，这种现象也被叫做异位表达。异位表达对谱系追踪的影响很大，常常会导致一些关于细胞命运的争议。

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谱系示踪的难点——基因标记的异位表达如何避免？（中）

在遗传谱系追踪实验的设计过程中，基因的异位表达往往需要我们着重关注的问题。目的启动子在非目的组织中的表达被称为异位表达。为了更精准的标记特定细胞类型，避免异位表达的影响，我们可以借助两个（甚至以上）的标记物进行标记，这时标记细胞就需要使用到多重组酶介导的遗传方法。图. 异位表达对谱系示踪的影响[1]

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多基因表达，连接元件2A和IRES如何选择？

在生物学研究中，你是不是经常会碰到这类问题：1. 想要对表达目的基因的细胞进行示踪，不知如何将目的基因与荧光蛋白进行连接？2. 想要用一个载体同时表达多个基因，不知如何将多个基因进行连接？其实要解决上述问题，通常有这么几种方法：● 构建多个表达框，用多个启动子启动多个转

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Epcam-2A-CreERT2小鼠（NM-KI-00084）：泛上皮诱导型Cre工具鼠

南模生物 Epcam-2A-CreERT2 小鼠（NM-KI-00084）以泛上皮标记基因 Epcam 的表达谱驱动他莫昔芬诱导型 Cre 重组酶，在小肠、大肠、肝脏、肾脏等上皮细胞中实现上皮特异、时间可控的条件性基因敲除与谱系示踪。附 Cre 活性验证数据，可配 flox、报告基因及 Dre 品系使用。

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Cell Stem Cell | 南模生物构建70余种遗传工具小鼠助力谱系示踪研究

2021年2月9日，来自中国科学院分子细胞科学卓越创新中心周斌研究组和上海市胸科医院何奔研究组合作在国际知名学术期刊Cell Stem Cell发表了题为 A Suite of New Dre-recombinase Drivers Markedly Expands the Ability to Perform Intersectional Genetic Targeting 的文章【3】，该研究构建了多种基于Cre-loxP和Dre-rox双同源重组酶系统的遗传工具小鼠，设计了多种遗传示踪和靶向操作的新策略，不仅实现了更为精准地遗传谱系示踪和遗传靶向操作，还极大的拓宽了遗传示踪和靶向操作技术使用范围。南模生物为该研究构建了70余种遗传工具小鼠。

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Map2-2A-CreERT2 成熟神经元诱导型 Cre 工具鼠

Map2-2A-CreERT2（NM-KI-00037）是以成熟神经元标志物 Map2 驱动的他莫昔芬诱导型 Cre 工具鼠，可在成熟神经元中实现时间可控的条件性基因操控与谱系标记，用于创伤性脑损伤、癫痫、神经元死亡等研究，遗传背景 C57BL/6，活体供应。

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