热销免疫缺陷小鼠
Find Cre 工具鼠
本文从实验设计思路出发，系统梳理Cre-loxP系统在谱系示踪中的应用逻辑——从单Marker基础模式到多Marker升级模式，从单色报告到交叉/独家/嵌套报告基因系统，再到双重组酶联用的实战案例（EMTracer系统追踪肿瘤EMT），帮你理清遗传修饰动物模型的组合策略，一篇搞定课题设计中的选鼠难题。
细胞谱系追踪技术通常是指使用各种手段对某类祖细胞亚群进行标记，在后续时间点对其分化命运进行检测，它对于揭开多样的、基础的生物学过程中的分子机制是非常关键，因此一直以来建立能够在体内进行追踪细胞谱系的动物模型是生物学研究的一个长期目标。图. 谱系追踪策略[1]自1990年代初以来，基因修饰技术一直用于
通常，细胞类型中基因的激活不是“有”或“无”，特定的基因标记意味着启动子的活性在这种细胞类型中相对较高，而在其他细胞中，目的启动子也可能被弱激活，这种现象也被叫做异位表达。异位表达对谱系追踪的影响很大，常常会导致一些关于细胞命运的争议。
通常，细胞或组织中的特异性 Marker 意味着启动子的活性在这种细胞类型中相对较高，而并非在其他细胞中完全不表达。在其他细胞中，目的启动子也可能被弱激活，这种现象也被叫做异位表达。异位表达对谱系追踪的影响很大，常常会导致一些关于细胞命运的争议。
细胞谱系追踪技术通常是指使用各种手段对某类祖细胞亚群进行标记，在后续时间点对其分化命运进行检测，它对于揭开多样的、基础的生物学过程中的分子机制是非常关键，因此一直以来建立能够在体内进行追踪细胞谱系的动物模型是生物学研究的一个长期目标。根据重组类型和数量，基因重组系统可以分为传统的单重组酶介导的遗传方
上期讲述的单重组酶报告基因系统只能依赖一个 Maker 来定位我们的目的细胞，如果没有特定细胞类型特有的基因，则无法通过常规方法对其进行特异性标记。往期推文：【谱系示踪系列第一期】基础细胞标记方式【谱系示踪系列第二期】单重组酶介导的多色报告系统方法但随着细胞分类的不断深入，我们往往需要两个甚至两个以
在遗传谱系追踪实验的设计过程中，基因的异位表达往往需要我们着重关注的问题。目的启动子在非目的组织中的表达被称为异位表达。为了更精准的标记特定细胞类型，避免异位表达的影响，我们可以借助两个（甚至以上）的标记物进行标记，这时标记细胞就需要使用到多重组酶介导的遗传方法。图. 异位表达对谱系示踪的影响[1]
谱系示踪中，启动子在非目标细胞中的弱激活（异位表达）是导致细胞命运追踪争议的常见原因。独家报告基因系统（Exclusive Reporter）利用Cre-loxP与Dre-Rox双重组酶的错落排布，使首次重组自动阻断二次重组，从而实现A⁺B⁻细胞的精准标记，排除异位表达干扰。本文详解独家报告基因系统的结构设计、两种重组先后顺序下的标记逻辑，以及c-kit基因在心脏谱系追踪中的经典应用案例，为选择合适的报告基因工具鼠提供参考。
本文系统介绍两类基础细胞标记策略：基于KI/TG的直接标记（随机转基因、融合表达、共表达、取代表达四种构建方式）和基于Cre-loxP重组酶系统的永久遗传标记（含组成型Cre和诱导型CreERT2），解析转基因小鼠及报告基因工具鼠在谱系示踪中的应用原理与选择逻辑，为工具小鼠的选型提供参考。
本文系统讲解Brainbow-1（lox变体切除式）与Brainbow-2（反向loxP倒转式）的设计原理、重组逻辑与颜色输出，配合具体案例图解，帮助大家理解这类报告基因工具鼠的工作机制，并为后续选择合适的转基因小鼠谱系示踪方案提供参考。
