F8-KO
品系全名
B6.129S-F8tm1Smoc
目录号
NM-KO-00012
品系状态
活体
基因信息
基因名
F8
品系描述
血友病A是由凝血因子VIII(FVIII)缺乏和(或)其功能障碍所引起的X连锁隐性遗传性出血病。FVIII基因敲除小鼠模型(简称“血友病A小鼠模型”),该小鼠模型具有明确的血友病A症状。该小鼠模型的建立为我国血友病A治疗药物的筛选和评价,以及血友病A的基因治疗研究提供了理想的动物模型和研究手段,具有重要的应用价值。饲养时需注意同笼小鼠间争斗可能导致小鼠内出血甚至死亡,剪尾后必须采取及时的止血措施如烧灼尾部切口,防止敲除纯合子小鼠失血和死亡。 通过敲除F8基因exon 16-19,建立F8-KO小鼠模型。与此相似的品系还有F8-KO(2)(NM-KO-200608),敲除区域为exon 1-26。
疾病预测
Hemophilia
验证数据
Fig1. FVIII基因敲除小鼠构建策略示意图
Fig2. FVIII基因敲除小鼠基因型鉴定PCR结果
Fig3. FVIII基因敲除小鼠FVIII mRNA表达水平检测结果
Fig4. FVIII基因敲除小鼠免疫组化染色结果
Fig5. FVIII基因敲除小鼠FVIII活性检测
Fig6. FVIII基因敲除小鼠APTT检测
经实验证实FVIII基因敲除小鼠具有典型的血友病A表型:
在进行小鼠剪尾和脚趾编号时,若不给予及时的止血处理,雄性杂合子小鼠和雌性纯合子小鼠会因大量失血而死亡。
FVIII活性检测显示(Fig5),雄性杂合子(-/y)和雌性纯合子(-/-)小鼠的FVIII的活性仅为野生型(wt)小鼠的8%和10%,而雌性杂合子小鼠的活性为野生型小鼠的80%。
激活的部分凝血活酶时间(APTT)检测显示(Fig6),雌性杂合子小鼠的APTT时间比野生型小鼠的略有延长,而雄性杂合子(-/y)和雌性纯合子(-/-)小鼠的APTT值均大于120秒。
Fig7. 不同品系F8敲除小鼠活化部分凝血活酶时间(APTT)检测。结果显示F8-KO小鼠(NM-KO-00012)凝血所需时间明显长于野生型小鼠,且F8-KO(NM-KO-00012)与F8-KO(2)(NM-KO-200608)凝血时间无明显差别,表型类似。
FVIII基因敲除小鼠是在整体动物水平研究血友病A发病机制和药物筛选的理想动物模型,可以为血友病A治疗药物的筛选和评价、血友病A的基因治疗等研究提供理想的动物模型和新的实验手段。为进一步阐述疾病发生机制、疾病防治药物的评价筛选和新疗法的研发提供了有效工具。
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