【小鼠大学问】5种重要的采血姿势你get了吗?


尾尖采血

  • 麻醉小鼠后,用温水擦拭尾巴,引起轻微的血管扩张。但水温不要过高。
  • 用无菌手术刀、刀片或锋利的剪刀,快速截断小鼠尾尖0.5-1cm。如果需要多次采血,之后每次仅需截除2-3mm。
  • 可以从尾部向尾尖方向按摩,以增加血流。但是,这会降低血样的质量,增加溶血的风险。
  • 可以用毛细采血管收集血液,或直接滴入收集管中。
  • 采血结束后,按压伤口或使用止血剂(如硝酸银)来止血。
  • 每次采血量大约可达0.1ml。

眼眶静脉丛采血

  • 小鼠经气体麻醉后,左手拇指及食指压迫小鼠的颈部两侧,使眼球突出,眼眶后静脉丛充血。也可以将小鼠放置在侧卧位,拇指与食指分别置于小鼠头顶和下颌,将皮肤向后及向下拉。
  • 抓握时要避免对气管施压,否则可能会影响小鼠呼吸。
  • 将毛细采血管置于内侧眼角处,并且以与鼻翼平面成30-45度刺入。
  • 在轻轻旋转采血管的同时施加压力。血液将通过毛细作用流入采血管。
  • 不能刺地过深,一般2-3mm即可。
  • 采血结束后,立即松开手指对小鼠的压迫,使眼球复位,同时将采血器拔出。
  • 可用干棉球压住眼眶,确保止血。
  • 一般眼眶静脉丛采血量可以达到0.2-0.3ml。

  • 图1.jpg

颌下静脉采血
  • 保定小鼠,可将小鼠侧卧,使小鼠头部尽量固定。
  • 在小鼠嘴角沿线与外眼角线橡胶处找到颌下静脉的大致位置,会发现一个无毛的小点,有点像酒窝。基本位于嘴角远端稍低于下巴线。
  • 针保持垂直于皮肤表面,刺入皮肤。深度不超过针头的斜面。
  • 拔出针头后,血液就会流出。为方便采血,可使小鼠头部低于心脏高度。
  • 可以直接使血液滴入采集管,也可以使用毛细采血管。
  • 采血结束后,按压以止血。
  • 一般采血量为0.2-0.5ml。

  • 图2.jpg

隐静脉采血
  • 将小鼠置于固定管或架中,但保持后腿可自由活动,剃除跗部的毛。
  • 为使膝盖与踝关节之间的隐静脉更加明显,可以在后腿膝盖以上使用止血带。在近尾侧的皮肤表面可以找到隐静脉。
  • 针垂直于皮肤表面扎破血管。不要进针过深,以免刺穿肌肉或碰到骨头。
  • 血液会从入针处慢慢流出,用毛细采血管收集,并松开止血带。
  • 采血结束后,按压伤口或使用止血剂(如硝酸银)以止血,并将小鼠放回笼内。

  • 图3.jpg

心脏采血

  • 一般有3种心脏采血的姿势:
    1、托起小鼠躯干使身体垂直与地面。身体直立以防止心脏的偏转或胸部的扭曲。使用1毫升注射器和22g针头。将针头从胸部中央向下5mm处插入,深度5-10mm,将注射器与胸部保持25-30度。
    2、使小鼠仰卧,通过胸骨垂直插入针头。
    3、使小鼠侧卧,垂直于胸壁插入针头。
  • 如果血液没有立刻进入注射器,可以轻轻抽空针管,产生一个真空区。
  • 当注射器中出现血液时,将针管保持静止并轻轻地抽拉活塞芯杆,以获得更多地血液。
  • 一般可以采到0.8-1.0ml血液。

  • 图4.jpg


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参考文献

1、Diehl K. H, et al. A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes. J.Appl.Toxicol.21,15-23. (2001).

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