冻存保种与复苏

冻存保种与复苏可降低基因工程小鼠品系保持的成本,保证珍贵的小鼠品系不会因疾病、不育、天灾人祸以及遗传性状的改变而造成太大损失。生物净化可防止一些病原体污染可能对实验结果造成的干扰,使小鼠维持良好的生长、繁殖、生理特性。

将活体品系保存于液氮中,减低活体保种的费用、表型丢失、繁育能力下降等风险。做到随用随取的快捷操作方式。

胚胎冻存

方法:将超排后的雌鼠与目的雄鼠进行交配,第二天取2细胞进行慢速冷冻,存放于液氮中。
优势:慢速冷冻的胚胎复苏后成活率高(80%以上),且移植后的小鼠怀孕率及产仔率高。
缺点:操作难度高,需要高昂的程序冷冻仪,操作时间达到6个小时。

精子冻存

方法:将雄鼠处死取出精子通过快速冷冻保存于液氮中
优势:操作速度快,精子保存量大。
缺点:复苏时需要进行体外受精,且受精率低(一般为15%-25%)

胚胎复苏

目的:将冻存胚胎进行复苏、移植获得所需的大、小鼠 。

方法:将冻存的胚胎从液氮中取出,室温解冻,放入相应的复苏液中进行复苏操作。将存活的卵移植入假孕母鼠体内,获得所需要大、小鼠。

精子复苏

目的:将冻存精子进行复苏获得所需的小鼠。 

方法:将冻存的精子从液氮中取出放置于37度10分钟后转入TYH中进行精子获能,获能后的精子通过体外受精的方式获得受精卵,移植入假孕母鼠体内,获得所需要的小鼠。

目的:将受病原体污染的大、小鼠净化至SPF级。

方法:每个品系只需提供两只雄鼠,2-3月龄,即可完成生物净化。将超排后的雌鼠与需要净化的雄鼠进行交配,第二天取2细胞进行胚胎移植。适用于大多数的转基因、敲除或者单基因突变的品系。


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