多靶点代谢药物，能不能在同一只小鼠里评价？这款三人源化品系把三个受体凑齐了

多靶点代谢药物走到体内评价这一步时，三靶点人源化小鼠是常被问到的一类工具。代谢性疾病的药物研发正在从单靶点走向多靶点。GLP-1 受体（GLP1R）激动剂之后，研发端开始把胰高血糖素受体（GCGR）、成纤维细胞生长因子受体 1（FGFR1）等靶点纳入同一个分子的设计中，希望在控糖、减重与改善肝脏脂质代谢等方面获得更均衡的作用组合。双靶点、多靶点激动剂已经成为肥胖与代谢相关脂肪性肝病方向的重要研发思路。

问题出在评价环节。多肽与抗体类药物对受体的识别具有种属特异性：一个针对人源受体设计的分子，作用于小鼠同源受体时的亲和力与活性未必一致，直接在普通小鼠体内读出的药效数据，未必能反映它在人体内的行为。对单靶点分子而言，把对应的一个受体人源化即可；但对同时作用于三个受体的分子来说，只人源化其中一个或两个，剩下那个仍是鼠源受体，评价链条依然是断的。三个靶点需要在同一只动物体内同时具备人源序列。

品系构建

针对这一需求，研发人员通过hFGFR1（目录号 NM-HU-230070）与 hGCGR/hGLP1R（目录号 NM-HU-233747）小鼠交配，获得 hFGFR1/hGCGR/hGLP1R 小鼠，在同一只动物体内同时携带三个受体的人源化改造。

图1：三靶点人源化小鼠多组织FGFR1的WB检测

图2：三靶点人源化小鼠肝肾GCGR的Western blot检测

图3：人源GLP-1R在胰岛与下丘脑延髓神经元的IHC

图4：人源GLP-1R在肾胃与肌间神经丛的IHC检测

验证数据

FGFR1 蛋白表达验证。以Western blot 检测心、肝、肺、肾与腓肠肌中的 FGFR1。野生型对照小鼠与三基因纯合小鼠的上述组织中均可检出 FGFR1；官网说明所用抗体对人源与小鼠 FGFR1 具有交叉反应（图1）。

GCGR 蛋白表达验证。以Western blot 检测肝与肾中的 GCGR。野生型对照小鼠与三基因纯合小鼠的肝、肾中均可检出 GCGR（图2）。

人源GLP-1R 的组织定位（一）。以免疫组化检测人源GLP-1R 的分布。阳性信号仅见于胰岛，以及位于下丘脑与延髓的神经元（图3）。

人源GLP-1R 的组织定位（二）。同样以免疫组化检测，阳性信号仅见于肾、胃与肌间神经丛（图4）。

需要说明的是，图1 所用抗体对人源与小鼠 FGFR1 均有反应，因此两种基因型都呈阳性属于预期结果，该图反映的是蛋白层面的可检出性与组织分布，不构成人源化的判别依据。图3 与图4 采用的是针对人源 GLP-1R 的免疫组化检测，给出的是该受体在胰岛、中枢特定核团、肾、胃与肌间神经丛等部位的定位信息，这几处也正是评价 GLP-1 受体激动剂时常关注的作用部位。

应用方向

基于上述验证数据，hFGFR1/hGCGR/hGLP1R 小鼠适用于同时靶向 GLP1R、GCGR 与 FGFR1 的多肽、抗体及融合蛋白类分子的体内评价，可在一只动物上完成多靶点分子的给药与取材，减少跨品系比较带来的批次差异；也可用于单靶点或双靶点分子在三受体人源化背景下的对照实验。结合人源 GLP-1R 在胰岛、下丘脑、延髓、肾、胃与肌间神经丛的定位信息，取材部位的选择也有了明确的参照。

评价同时靶向GLP1R、GCGR 与 FGFR1 的分子，为什么要用三靶点人源化小鼠？

多肽与抗体类药物对受体的识别具有种属特异性，只人源化其中一个或两个靶点，剩下的仍是鼠源受体，评价体系并不完整。hFGFR1/hGCGR/hGLP1R 小鼠（目录号 NM-XA-250626）由 hFGFR1 与 hGCGR/hGLP1R 小鼠交配获得，在同一只动物体内同时携带三个受体的人源化改造，可作为多靶点激动剂动物模型完成给药与取材，减少跨品系比较带来的批次差异。

hFGFR1/hGCGR/hGLP1R（目录号：NM-XA-250626）由南模生物研发。

关于南模生物

上海南方模式生物科技股份有限公司（Shanghai Model Organisms Center, Inc.，简称“南模生物”），成立于 2000 年 9 月，是上交所科创板上市高科技生物公司（股票代码：688265），专注于模式生物领域，为高校、科研院所及制药企业提供基因修饰动物模型产品与解决方案。咨询电话 400-728-0660。