APOE2/3/4 人源化小鼠模型


APOE基因编码一个称为apoE的脂蛋白元(apolipoprotein),主要在肝脏和大脑中表达,主要功能是参与胆固醇的吸收,合成和分配。APOE基因有三种常见的变异型,分别是E2, E3和E4变异型,互相之间,仅有一个核苷酸的区别,目前已确认APOE基因E4变异是最主要的老年痴呆症风险变异。研究发现携带一条E4变异的人群,罹患老年痴呆症的风险增加3倍,而携带二条E4变异,得病风险增加12倍。并且携带E4变异的患者症状出现得更年轻,病程发展更快,脑中的淀粉样蛋白斑块也更多更大更结实。(Nat Rev Neurol. 2013 Feb; 9(2): 106–118)

微信图片_20191120164446.jpg


以下数据包括APOE2-HU, APOE3-HU, APOE4-HU三种小鼠的构建策略和鉴定数据。

APOE2-HU人源化小鼠验证数据

构建策略

Apoe2-1.jpg

Fig1. Apoe 敲除小鼠、APOE2人源化小鼠构建策略。

表达验证

Apoe2-2.png

Fig2. RT-PCR验证结果。引物对 P1/2 特异针对野生型及基因敲除小鼠,引物对 P3/4 特异针对APOE2人源化小鼠。WT小鼠用 P1/2 引物对可扩增出 342 bp 产物; KO小鼠用 P1/2 引物对无条带,人源化小鼠用 P3/4 引物对可扩增出 332 bp 产物。

引物对 P1/2 Wild type = 342 bp

引物对 P3/4 mutant = 332 bp

M:100bp Plus DNA ladder.

Apoe2-4.png

Fig3. Western blot 检测发现 APOE2 蛋白在人源化小鼠中有高表达。

APOE抗体:Sc-13521(santa cruz)

APOE2-HU订购

Apoe-KO订购


Apoe3-HU人源化小鼠验证数据

构建策略

Apoe2-1.jpg

Fig1. Apoe 敲除小鼠、APOE3人源化小鼠构建策略。

表达验证

Apoe3-2.pngFig2. RT-PCR验证结果。引物对 P1/2 特异针对野生型及基因敲除小鼠,引物对 P3/4 特异针对APOE3 人源化小鼠。WT小鼠用 P1/2 引物对可扩增出 342bp  产物;  KO 小鼠用 P1/2引物对无条带,人源化小鼠用 P3/4 引物对可扩增出332bp 产物。

引物对 P1/2 Wild type = 342 bp

引物对 P3/4 mutant = 332 bp

M:100bp Plus DNA ladder.

Apoe3-4.png

Fig3. Western blot 检测发现 APOE3 蛋白在人源化小鼠中高表达。

APOE抗体:Sc-13521 (santa cruz)

APOE3-HU订购

Apoe-KO订购


Apoe4-HU人源化小鼠验证数据

构建策略

Apoe2-1.jpg

 Fig1. Apoe 敲除小鼠、APOE4人源化小鼠构建策略。

表达验证

Apoe4-2.png

Fig2. RT-PCR验证结果。引物对 P1/2 特异针对野生型及基因敲除小鼠,引物对 P3/4 特异针对APOE4 人源化小鼠。WT小鼠用 P1/2 引物对可扩增出 342bp  产物;  KO 小鼠用 P1/2引物对无条带,人源化小鼠用 P3/4 引物对可扩增出332bp 产物。

引物对 P1/2 Wild type = 342 bp

引物对 P3/4 mutant = 332 bp

M:100bp Plus DNA ladder.

Apoe4-4.png

Fig3. Western blot检测发现 APOE4 蛋白在人源化小鼠中高表达。

APOE抗体:Sc-13521(santa cruz)

APOE4-HU订购

Apoe-KO订购


注:本文转载自南方生物,转载目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责。如有侵权行为,请联系我们,我们会及时删除。

你也可能感兴趣

Tamoxifen诱导Cre-ERT2小鼠 使用指南

Cre-ERT2在无Tamoxifen诱导的情况下,在细胞质内处于无活性状态;当Tamoxifen诱导后,Tamoxifen的代谢产物4-OHT(雌激素类似物)与ERT结合,可使Cre-ERT2进核发挥Cre重组酶活性。

查看
【小鼠大学问】基因工程小鼠的命名规则

常见的基因工程小鼠可以分为两种命名方式,包括基因定点修饰的小鼠命名,比如:敲除、敲入、点突变等等,和随机转基因的小鼠命名。

查看