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【小鼠大学问】养小鼠你要知道的那些事(二)


小鼠饲养繁育的基础 ——“吃 住 行”与“户籍登记”。

小鼠深谙少食多餐之道,因为它们的胃容量小,需要随时采食。

图1.jpg

小鼠的门齿是终生不断生长的,通过啃咬磨牙控制牙的长度。所以吃的颗粒饲料要有一定比例的粗纤维,具有一定的硬度,以便小鼠磨牙。平时饲料要放在专用容器中保存,并放在通风干燥处,一周内用完。

饲料的消毒有两种方法

1、预真空高压湿热消毒,此法破坏其中的营养成分较多。

2、Co60射线照射,这种方法对营养成分的破坏很小,不过成本比较高。

小鼠喝的饮水,必须使用经过多级过滤的纯净水或经过高温高压灭菌处理的无菌水。要保证饮水的连续不断,记得检查瓶塞,防止瓶塞漏水造成小鼠溺死或饮水管堵塞使小鼠发生脱水。

小鼠住的SPF级动物房在各方面都受到严格的监控。

图2.png

垫料是直接接触小鼠的铺垫物,可以吸湿、保暖、作窝。所以要选择吸水性好、无刺激性、无粉尘、无毒的垫料。常见的垫料比如玉米芯、木屑等,需高压灭菌使用。

图3.jpg

小鼠排泄物发酵分解产生的污染物中浓度最高的是氨。室内温度上升、密度增加、通风条件不良、排泄物或垫料未及时清除时,都可能使室内氨浓度上升。氨浓度升高后会刺激小鼠粘膜(比如鼻腔、呼吸道等)。所以除了每周要更换垫料和清洗笼具1-2次(IVC笼具可视情况适当延长更换周期),保持小鼠的清洁干爽以外;还要控制饲养密度,不能过度密集,一般小笼饲养每笼不超过4-5只成年小鼠。

SPF级小鼠要出行也必须全副武装。

短途运输小鼠也要配置专用车辆,由专人负责,并对车辆定期消毒。车辆应装有空调设备,车内温度也要控制在20-26度。运输笼具须经过消毒灭菌,尽量采用小型啮齿动物专用运输箱,保证充分换气并防止外面微生物污染,维持SPF级环境。运输箱在车里要固定,以防急刹车或颠簸。

图4.jpg

带有透气滤膜的运输箱


如果需要长途运输小鼠,在运输箱内要添加足够的果冻供小鼠采食。不过经过遥远的路途颠簸,小鼠在到达目的地后往往会出现体重的减轻,并或多或少产生一些应激反应。因此在接收小鼠后最好不要立即进行实验,而是让小鼠休息2-7天,缓一缓,适应新的环境。

不同品系、不同性别的小鼠不能放在一个运输箱内不过,有时候在小鼠数量很少的情况下,可以选用带有隔断的运输箱来运输不同品系或不同性别的小鼠,可以节省空间和成本。

由于小鼠皮肤没有汗腺,唾液分泌能力也有限,因此运输途中如果环境温度升高,小鼠只能以体温升高、代谢率下降以及耳血管扩张来加快散热。如果环境持续高温(比如34度以上)就会引起死亡或产生后效应。所以尽量避免高温天气运输,减少小鼠的应激和死亡。

图5.jpg

户籍记录

小鼠出生后就应该及时做好登记与记录,做好“户籍”工作。

小鼠常用编号方法

1.染色法

染色标记法是用毛笔或棉签蘸取化学药品,在实验动物体表不同部位涂上斑点,以示不同编号。缺点在于若实验时间较长,颜色可自行消褪,黑色毛色小鼠不易上色,再加上动物之间互相摩擦,尿、水浸湿被毛等原因,均可使编号不清。一般仅用于实验周期很短以及小鼠数量不多的情况。

常用染液有: 3%-5%的苦味酸溶液(黄色); 0.5%的中性品红溶液(红色); 2%的硝酸银溶液(咖啡色)。

2.耳孔法

可以用专门的耳孔机在小鼠耳朵上打孔或造成缺口,或者用剪刀在耳边缘剪出不同的缺口进行编号。在剪缘或打孔后用消毒滑石粉抹于局部,以利愈合后辨认。

3.断趾法

新生小鼠可根据前肢4趾,后肢5趾的切断位置来编号。断趾时,应切断其1段指骨,不能只断指尖,以防伤口痊愈后辨别不清。如果采用断趾法来给小鼠编号“上户口”的话,为了最大程度降低小鼠的疼痛,必须在小鼠出生后7天内进行编号。超过7天后,就需要先麻醉再断趾编号。

image.png

上海南方模式生物小鼠编号规则:所有标记数字相加即为小鼠编号;10不参与20-90的编号组合。


小鼠信息记录

1.笼卡

笼卡上信息的记录与填写对于小鼠的管理非常重要!不仅有利于自己对小鼠的管理与使用;当你有时候需要小伙伴们帮忙处理小鼠时,他们也能轻松清楚地找到正确的小鼠,不会发生乌龙事件。

所以要及时给小鼠编号上户口,更新笼卡信息,而且在换笼或实验操作时要注意笼卡不要挂错或遗失,以免造成混乱。

饲养笼的笼卡上一般包括以下信息:

  • 品系名称
  • 亲代编号
  • 代次信息
  • 出生日期
  • 性别与数量
  • 个体编号
  • 个体基因型等

  • 图7.png

繁殖笼的笼卡上则一般包含以下信息:

  • 品系名称
  • 双亲号码
  • 合笼或见栓日期
  • 出生日期
  • 产仔数
  • 断乳日期
  • 断乳小鼠性别与数量等

  • 图8.png

2.饲养记录

除了笼卡以外,我们还要用表格把所有的小鼠情况汇总记录下来,可以包括小鼠的编号、出生日期、代次、性别、基因型信息、亲代小鼠信息、交配日期、目前状态、体重信息等等。

图9.png

这样就可以方便地进行管理和统计啦,及时总结还可以尽早发现繁育过程中出现的问题,比如不育、出生率低、雌雄比例失调、小鼠发育迟缓等等。

千里之行始于足下,好的记录习惯可以做到有迹可循、有源可溯,这对后续较为复杂的不同基因型小鼠的繁育非常重要哦!

下期我们就将介绍转基因、基因敲除与条件性基因敲除小鼠的繁育流程。



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