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R26-(CAG-LSL-mCherry-EGFP-LC3-pA) 小鼠

品系名:C57BL/6J-Gt(ROSA)26Sorem1(CAG-LSL-mCherry-EGFP-Map1lc3a-pA)Smoc 修饰方式:Knock-in 应用:

荧光示踪

采用CRISPR/Cas9技术,通过同源重组的方式,在Rosa26基因位点定点插入CAG promoter-loxp-stop-loxp-mCherry-EGFP-Map1lc3a-WPRE-polyA表达框。Map1lc3a也就是LC3,是一个广泛表达的自噬小泡特异标志物。该基因Rosa26位点条件性过表达杂合子小鼠无明显异常,loxp-stop-loxp表达框的存在阻止了下游目的基因LC3的转录,与Cre小鼠交配后,在其后代双阳性小鼠中,Cre表达的组织和细胞类型,loxp-stop-loxp表达框将被敲除,目的基因LC3在CAG启动子的驱动下,在缺血性损伤后的吞噬细胞中以pH依赖性方式表达mCherry和EGFP。两个共同表达的荧光信号根据自噬小泡在细胞内的酸性环境变化而变化。mCherry在酸性环境(pKa 4.5)为稳定,而EGFP在溶酶体内的酸性环境(pKa 5.9)中会发生淬灭现象。这一特性使得细胞自噬现象根据细胞自身溶酶体工作与否区分开来。在pH较高的自噬小泡中,GFP与mCherry的荧光叠加呈现黄色荧光;而在pH较低的溶酶体中,EGFP淬灭,只能检测到红色荧光信号。可用于标记及追踪LC3、研究缺血性损伤后各种组织中自噬的起源、进展和消失。

R26-(CAG-LNL-Cas9-IRES-Luciferase-pA)1 小鼠

品系名:C57BL/6J-Gt(ROSA)26Sorem1(CAG-LNL-Cas9-IRES-Luciferase-pA) 修饰方式:Knock-in 应用:Cas9,基因编辑

利用CRISPR基因编辑技术,将CAG-LoxP-Neo-LoxP-Cas9-IRES-Luciferase-polyA结构插入到Rosa26基因中。与Cre工具鼠交配后,可在有Cre表达的细胞中表达Cas9核酸酶,同时带有荧光素酶报告基因的表达。

R26-(CAG-LSL-dCas9-VPR-IRES-EGFP-WPRE-pA) 小鼠

品系名:C57BL/6J-Gt(ROSA)26Sorem1(CAG-LSL-dCas9-VPR-IRES-EGFP-WPRE-pA) 修饰方式:Knock-in 应用:基因调控工具,基因激活,CRISPRa

利用CRISPR基因编辑技术,将CAG-LoxP-STOP-LoxP-dCas9-VPR-IRES-EGFP-WPRE-polyA结构插入到Rosa26基因中。失活的dCas9与三元转录激活因子VPR(VP64-p65-Rta)融合,与Cre工具鼠交配后,可在有Cre表达的细胞中对目的基因进行转录激活调控,增强目的基因的表达。

Cdh5-(rtTa-tetO-Cre) 小鼠

品系名:B6;129-Cdh5tm1(rtTa-tetO-Cre)Smoc 修饰方式:Knock-in 应用:Cre工具鼠

通过ES细胞打靶途径,将m2rtTa-wpre-pA-attp-PGK-Neo-pa-attb-long Insulator-tetO-Cre-frt-wpre-frt-polyA-long insulator结构插入到Rosa26基因中。

Cdkn2a-(DTRGFP-2A-Luc) 小鼠

品系名:C57BL/6J-Cdkn2atm1(DTRGFP-2A-Luc)Smoc 修饰方式:Knock-in 应用:荧光示踪

通过ES细胞打靶途径,将DTRGFP-2A-Luciferase-wpre-polyA结构插入到Cdkn2a基因ATG位置。

R26-(SA-RNR-GFPDTR-FWF-pA) 小鼠

品系名:B6;129-Gt(ROSA)26Sortm1(SA-RNR-GFPDTR-FWF-pA) 修饰方式:Knock-in 应用:

通过ES细胞打靶途径,将SA-Rox-Neo-Rox-GFPDTR-Frt-Wpre-Frt-pA结构插入到小鼠Rosa26基因中。

Soat2-CKO 小鼠

品系名:C57BL/6J-Soat2tm1Smoc 修饰方式:Conditional knockout 应用:

通过ES细胞打靶途径,flox Soat2基因exon11-12。可与组织特异性Cre工具鼠交配,在表达Cre酶的细胞中,条件性敲除Soat2基因。

Becn1-CKO 小鼠

品系名:C57BL/6-Becn1tm1Smoc 修饰方式:Conditional knockout 应用:

通过ES细胞打靶途径,flox Becn1基因exon3。可与组织特异性Cre工具鼠交配,在表达Cre酶的细胞中,条件性敲除Becn1基因。

Brca1-CKO 小鼠

品系名:C57BL/6-Brca1tm1Smoc 修饰方式:Conditional knockout 应用:乳腺癌,肿瘤研究

通过ES细胞打靶途径,flox Brca1基因exon5。可与组织特异性Cre工具鼠交配,在表达Cre酶的细胞中,条件性敲除Brca1基因。

Atg7-CKO 小鼠

品系名:C57BL/6-Atg7tm2Smoc 修饰方式:Conditional knockout 应用:自噬研究

通过ES细胞打靶途径,flox Atg7基因exon4。可与组织特异性Cre工具鼠交配,在表达Cre酶的细胞中,条件性敲除 Atg7基因。

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